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体液免疫检查,自身抗体在自身免疫性疾病诊治
分类:急救指南

体液免疫主要是由B细胞承担,反映体液免疫的项目有B细胞及其亚群计数、B细胞分泌的免疫球蛋白或自身抗体水平、补体及循环免疫复合物水平测定等。

自身免疫性疾病概念:自身免疫性疾病(autoimmune disease,AID)是指机体免疫系统出现异常,产生自身抗体和自身反应性淋巴细胞攻击相应的自身正常细胞和组织导致组织器官损伤和功能障碍所引起的疾病。分类:通常按疾病累及器官组织的范围将自身免疫性疾病分为器官特异性和非器官特异性两大类自身免疫性疾病。器官特异性:引起某一固定器官的损伤,常见的有Graves病、I型糖尿病、溃疡性结肠炎等。非器官特异性:是系统性、全身性的疾病,常见的有类风湿性关节炎、干燥综合症等。共同特征:多数病因不明;患者以女性居多,并随年龄增加发病率有所增加;有遗传倾向;患者血清中有多种自身抗体或自身反应性致敏淋巴细胞存在;疾病有重叠现象,即一个病人可同时患一种以上自身免疫病;病程一般较长,多迁延为慢性;病损局部可发现淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞等浸润;免疫抑制剂治疗可取得一定疗效。

B 细胞及其亚群计数

自身抗体概念:是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白,是自身免疫和自身免疫性疾病重要特征之一,很多自身免疫病都伴有特征性的自身抗体,根据自身疾病的不同也分为脏器特异性自身抗体和脏器非特异性自身抗体。特性:自身免疫性疾病的重要标志。高滴度存在于自身免疫性疾病患者体内与疾病的活动性相关参与免疫病理性损伤自身抗体检测的临床应用:大多数自身免疫患者血清中可测到高效价的自身抗体,特别是有些自身抗体的检测已纳入某些自身免疫性疾病的诊断标准中,自身抗体检测已是临床免疫检测的一项重要的实验室指标。

由于淋巴细胞表面有一种抗原称为CD抗原或CD分子,不同的淋巴细胞类型有不同的CD抗原。通过采用单克隆抗体以免疫荧光技术检测各群淋巴细胞的CD 抗原来计数淋巴细胞的数量。B细胞表面抗原为CD19 或 CD20。根据B细胞产生抗体时是否需要T细胞辅助分为B1(标记为CD5+CD19+ )和B2(标记为CD5-CD19+)细胞。前者为T细胞非依赖性细胞,产生低亲和力的IgM、IgA和IgG3抗体,参与抗细菌感染的黏膜免疫应答,还能产生多种针对自身抗原的抗体,与自身免疫病相关;后者为T细胞依赖性细胞,可产生高亲和力抗体,是参与体液免疫应答的主要B细胞,还有抗原提呈和免疫调节功能。外周血中B1细胞和B2细胞的百分比正常值分别为和。研究显示,系统性红斑狼疮患者的外周血B1淋巴细胞亚群的百分比、B1/B2淋巴细胞亚群比值显著高于正常对照,B1淋巴细胞亚群与狼疮活动性显著相关。

自身抗体检测项目:常检测的自身抗体主要包括以下几种:抗核抗体;抗中性粒细胞胞浆抗体;类风湿因子;抗角蛋白抗体;自身免疫性肝病相关自身抗体。目前临床上常做的自身抗体项目主要包括ANA检测系列、ANCA检测系列、心磷脂检测系列和RA检测系列以及自身免疫性肝病自身抗体谱。哪些疾病适合做哪种自身抗体检测?

B 细胞功能检测

什么疾病适合抗核抗体检测系列呢?有何临床意义?

1.免疫球蛋白 (Ig) 测定:IgG、IgA、IgM 定量检测:用散射比浊计进行测定的血清免疫球蛋白正常值为:IgG 6.94-16.18g/L,IgA0.7-3.8g/L,IgM 0.6-2.62g/L。高于正常值为B细胞功能亢进,低于以下值为B细胞功能缺陷:IgG<2.5g/L,IgA<(0.05-0.1)g/L,IgM<(0.05-0.1) g/L。表1列举不同疾病的血清 IgG、IgA和IgM水平变化。IgE的检测:包括IgE 总量测定和过敏原特异性 IgE检测,前者正常值为0-100IU/ml,数值与年龄相关,因过敏与非过敏者的总 IgE 水平有较大交叉,因此总 IgE 测定对于筛查过敏性疾病的意义不大。但也有资料显示婴幼儿总 IgE 增高患过敏性疾病的可能性增大,成人总 IgE 水平低患过敏性疾病的可能性小。过敏原特异性 IgE检测为检测针对某种过敏原的特异性 IgE 类抗体含量。经典测定法为放射性过敏原吸附试验,也可用皮肤试验或点刺法。放射性过敏原吸附试验适于:①严重的皮炎及皮肤划痕症阳性患者;②皮肤试验可能激发过敏性休克者;③有毒、非水溶性或高度致敏作用的抗原;④食品过敏原等。皮肤试验和接触性过敏的诱发是检测迟发型过敏反应的两种常用方法。

ANA可见于多种疾病,特别是结缔组织疾病,常作为结缔组织病的诊断、病情判断和疗效观察的指标在非结缔组织病:感染性疾病或肿瘤中,也可出现阳性正常人中也可出现阳性,但抗体滴度低,并且其常表现为IgM型高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病。目前,ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。

2.特异性抗体应答反应 主要是检测机体接触各种病原抗原后产生抗体的能力。免疫缺陷的患者抗体产生能力低下或缺如。

什么疾病适合做ANCA检测呢?

自身抗体检查

适合做抗中性粒细胞胞浆抗体检测的疾病有以下几种:原发性系统性小血管炎:韦格纳氏肉芽肿、显微型多动脉炎、坏死性新月体肾小球肾炎。炎症性肠病:溃疡性结肠炎、克罗恩病。自身免疫性肝病或结缔组织病:如原发性硬化性胆管炎、原发性胆汁性肝硬化、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎。药物引起或感染性疾病:药物性狼疮、甲状腺功能亢进、呼吸系统炎性疾病、细菌 、病毒 真菌。

自身抗体是B细胞针对自身抗原成分所产生的对自身组织或器官起反应的抗体,自身抗体可以针对细胞内成分也可以针对细胞外成分。根据影响的范围,自身抗体可以分为器官特异性和器官非特异性自身抗体。

心磷脂抗体检测适应证

1.器官非特异性自身抗体

抗心磷脂抗体:是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。是抗磷脂综合症的标志性抗体。它的免疫学分型有IgG、IgM、IgA 3类。研究表明:在系统性红斑狼疮病人中检测到的APL与血栓形成密切相关,且发现许多自身免疫性疾病和一些感染性疾病均可检测到抗心磷脂抗体,它可导致体内不明原因的动静脉血栓、习惯性流产、血细胞减少等症状。检测磷脂抗体适应症:所有系统性红斑狼疮患者、低龄卒中或外周动脉栓塞、连续2次或2次以上异常妊娠、无明显原因的静脉血栓、动脉栓塞患者怀疑APS的异常妊娠。

类风湿因子:是抗人类多克隆 IgG Fc 段的自身抗体。一般实验室检测的类风湿因子是 IgM 抗体 。因为类风湿因子最先在类风湿性关节炎病人血清中检测到,故得此名称。一般正常人类风湿因子滴度为 1:80 。需要强调的是即便存在类风湿因子,甚至是高滴度的,也不能做为诊断类风湿关节炎的特异性依据。约 1%-5% 健康人群体内存在类风湿因子。

类风湿性关节炎检测

抗核抗体:抗核抗体是以细胞的核抗原为靶抗原的自身抗体的总称。使用不同的血清稀释度可以对血清中抗核抗体行半定量。结果以阳性、阴性表示。还可描述荧光图谱,如均质型、周边型、斑点型、核仁型等,各型提示存在不同种类抗体。抗核抗体通常作为各种针对核抗原的不同抗体的筛查实验。抗核抗体检测是诊断系统性红斑狼疮等结缔组织病的重要实验室依据。

RA检测系列主要有类风湿因子、CCP检测和AKA检测三项检测项目,三种方法各有优缺点,相互结合能相互弥补其缺点,提高正确率。类风湿因子:类风湿因子(rheumatoid factor, RF)为抗变性IgG Fc的自身抗体,主要有IgM、IgG、IgA三个亚型,其致病机理是RF与体内变性IgG结合形成免疫复合物,激活补体或被吞噬细胞吞噬,产生炎性介质导致组织炎性损伤,使患者发生骨关节炎及血管炎。高滴度RF与RA的相关性越大,RF-IgG滴度与血沉、握力相关,RF-IgM滴度与RA病情活动度和关节外损失相关。CCP检测:RA早期诊断,45%RA病人RF阴性。CCP抗体阳性,出现于RA临床症状之前,预示疾病活动性,与关节损失相关,能够鉴别诊断。AKA检测:RA特异性抗体,敏感性低,特异性高,RA判断疾病活动性及预后的指标。

抗双链DNA抗体:是诊断系统性红斑狼疮的特异性抗体,抗体滴度还与疾病的严重程度相关,有助于临床诊断、判断预后以及了解系统性红斑狼疮的活动程度。

自身免疫性肝病及其自身抗体谱

抗可提取核抗原抗体:血清中针对一组水溶性、可使用盐水提取的核抗原成分的抗体。抗ENA 抗体是诊断自身免疫病有效的实验室检测,包括对系统性红斑狼疮、系统性硬化症、多发性肌炎、皮肌炎、混合性结缔组织病、干燥综合征和重叠综合征等的诊断。

自身免疫性肝病是与自身免疫密切相关的特殊类型的肝病,其诊断和治疗完全不同于一般的慢性病毒性肝炎。包括自身免疫性肝炎 和原发性硬化性胆管炎 。自身免疫性肝病具有相对特异性自身抗体谱,自身抗体检测对自身免疫性肝病的诊断及鉴别诊断具有重要意义,在多种累及肝胆疾患的自身免疫疾病中,自身抗体在发病机制中起重要作用。

抗 Sm 抗体:对诊断系统性红斑狼疮具有高度特异性,但诊断时系统性红斑狼疮病人只有15%-30%呈阳性,与病情活动无关。亚裔和非洲裔阳性率比白种人高。

总结

抗核糖核蛋白抗体:是混合性结缔组织病的特征性抗体。系统性红斑狼疮 和系统硬化症患者血清中也可阳性。

自身免疫性疾病是一种常见 、多发性疾病,因其临床症状的隐匿性和以往检验项目的不针对性等原因,不太容易明确诊断,导致延误病情。而早期诊断和治疗却又非常重要,目前大量商品化自身抗体检测试剂盒的出现,使得自身抗体检测在临床上推广普及,检测质量控制工作逐步标准化、规范化,自身抗体检测项目也从过去的总抗体检测,过度到针对抗原蛋白分子表位靶位点的特异性抗体检测,并形成不同的自身抗体谱,进一步满足了临床对自身免疫性疾病的诊治需求。

抗SSA和抗SSB抗体:两者常同时存在,是干燥综合征的特征性抗体。 系统性红斑狼疮病人也可存在上述两种抗体,尤其是明显对光敏感而无肾损害的病人。此外,新生儿狼疮综合征也可出现抗 SSA 和 / 或 SSB 抗体。

抗 Jo-1 抗体:是针对组氨酰-tRNA 合成酶的抗体。与皮肌炎关系较密切。虽然仅 25%-30%的皮肌炎病人抗 Jo-1 抗体阳性,但具有较高特异性。在合并有间质性肺部疾病的皮肌炎患者抗Jo-1 抗体阳性率较高。

抗 Scl-70 抗体:是针对DNA 拓扑异构酶 I的抗体,与弥漫性系统性硬化症关系最大,阳性率约 30%。

抗组蛋白抗体:与药物性狼疮相关。

抗中性粒细胞抗体:主要有2种免疫荧光类型,即分布于细胞浆 (cANCA) 和分布于细胞核周围 (pANCA)。cANCA 与 Wegener's肉芽肿有关,滴度与临床表现严重性相关。

抗心磷脂抗体:约40%的系统性红斑狼疮患者抗心磷脂抗体阳性。

2.器官特异性自身抗体

此类抗体较多,而且不断有新的抗体被发现和应用于临床。由于仅仅是针对特定组织或器官抗原产生的抗体,所以这类抗体主要与相对应的组织器官起反应,引起这些组织器官的损害。一般这类抗体在诊断相应的疾病中具有重要的价值,尤其是存在高滴度抗体时。

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